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制備色譜
閱讀�3181�(shí)間:2018-06-02 10:24:26

制備色譜是指采用色譜技�(shù)制備純物�(zhì),即分離、收集一種或多種色譜純物�(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物,以滿足研究和其它用�。制備色譜的出現(xiàn),使色譜技�(shù)與經(jīng)�(jì)利益建立了聯(lián)�。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩�(gè)重要指標(biāo)。其�,氣相制備色譜主要用于石油化工產(chǎn)品和揮發(fā)性天然產(chǎn)物的色譜純樣品制備�

�(jiǎn)�

  很多初接觸色譜領(lǐng)域的朋友�(duì)制備色譜這�(gè)名詞比較陌生。其�(shí),在化學(xué)化工�(yī)藥等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是最為典型的制備色譜,換句話�(shuō),將分析色譜的�(jìn)樣量增大,同�(shí)得出大量的所需物質(zhì)(餾分)的過(guò)程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一�(gè)(或者幾�(gè))純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。而制備色譜系�(tǒng)則是利用制備色譜的思想高效能得到純化物�(zhì)的多�(gè)分析�(cè)試設(shè)備聯(lián)用的總稱。右圖便是一套典型的制備色譜系統(tǒng)�

�(gòu)�

  傳統(tǒng)的制備色譜一般由一�(tái)可以連續(xù)輸送液體的恒流�、紫外檢�(cè)儀與色譜柱�(gòu)成,其中最重要的部件是�(jià)格不一,款式多樣的色譜柱,這也是影響最終制備效果的�(guān)鍵性環(huán)節(jié)。柱子有多種類型,不僅材�(zhì)不一,填料也有很多學(xué)�(wèn),下面簡(jiǎn)要的�(shuō)�(shuō)�(guān)于柱子的一些情況:
  各種�(guī)格的玻璃柱子在實(shí)�(yàn)室里頭很容易得到,而且�(jià)格低�,但玻璃柱子致命的弱�(diǎn)是它能承受的壓力很小,且非常容易破碎。當(dāng)由于壓力太小而導(dǎo)致流�(dòng)相流速很慢的�(shí)�,高位液面或加高壓空氣(或者氮?dú)猓┑牟捎檬且粋€(gè)�(jiǎn)單的解決辦法。在底下加真�,也能在一定程度上解決這�(gè)�(wèn)題�
  不銹鋼柱子具有良好的耐腐�、抗壓力性能,但其價(jià)格相�(duì)很貴。如�,只有很小的分離任務(wù)且經(jīng)�(fèi)也允許,市面上直徑為1cm的小型制備柱就是�
  有機(jī)玻璃柱子也能抗壓力耐腐�,相�(duì)不銹鋼柱子而言,它是半透明�,可以看到液體的�(yùn)行狀�(tài),對(duì)有色的物�(zhì)其特�(diǎn)就更為突��
  硅膠、鍵合固定相(如C18�、離子交換樹(shù)�、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填�。有不少文獻(xiàn)�(bào)道,�(duì)填料可以�(jìn)行一下處理提高了分離效果,如,對(duì)硅膠�(jìn)行的硝酸銀(或緩沖液)處理�
  1、制備色譜到底是什�?
  (1)分析色譜的目�,是分析出混合物中一�(gè)(或者幾�(gè))純物�(zhì)的含�。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)�
  為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效�,制備色譜的的�(jìn)樣品量很�,導(dǎo)致制備色譜柱子的分離�(fù)荷的相應(yīng)加大,也就必須加大色譜柱填料,增大制備色譜的直徑和長(zhǎng)�,使用的相對(duì)多的流動(dòng)��
  然而,�(dāng)色譜柱上樣品�(fù)載加大的�(shí)�,往往�(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的�(chǎn)品。制備色�,要解決容量與柱子效果之間的矛盾,對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從�(jīng)�(jì)上來(lái)�(shuō)。制備色譜要�(zhēng)取少用填�,少用溶�,要盡可能多的得到產(chǎn)品�
  (2)樣品的前處理�
  制備色譜柱子由于處理的樣品多,比分析柱子更容易受污染,所�,必要的前處理就顯得非常的必�。萃�、過(guò)�、結(jié)�、固相萃取等�(jiǎn)單的分離方法,如果用得上,而且還不是很麻煩,就要盡可能多的采用以去掉雜�(zhì)�
  (3)固定相的選擇
  硅膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹(shù)�、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。有不少文獻(xiàn)�(bào)�,對(duì)填料可以�(jìn)行一下處理提高了分離效果,如,對(duì)硅膠�(jìn)行的硝酸銀(或緩沖液)處理�
  (4)裝柱方法的選擇根�(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸,采用不同的裝柱方法,往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度�(guān)系很�,顆粒度的減少會(huì)�(dǎo)致裝柱的難度。一般來(lái)�(shuō),顆粒直徑小�20-30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲�-裝填”技�(shù)適用于顆粒直徑大�25um的固定相。濕法的目的是迫使相�(duì)稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子,從而減少空隙的形成。然�,當(dāng)柱直徑大�20mm,所加壓力為30-40bar�(shí),高壓懸漿裝填技�(shù)就變得十分復(fù)�。為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱,可采用柱長(zhǎng)壓縮技�(shù)。這種方法,先將固定相懸漿(或偶爾是干填充物)裝入柱中加壓,利用物理方法將其壓�。壓緊的方法有兩種:徑向壓縮和軸向壓�。濕法裝柱需要一定的�(shè)�,在柱子填完�,應(yīng)用有柱效的測(cè)�,對(duì)柱效低的柱子�(yīng)該重��
  (5)流動(dòng)相的選擇
  除了和分析色譜同樣的考慮外,在選用流�(dòng)相時(shí),要考慮色譜分離后面加有旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等二次分離操作。一般來(lái)�(shuō),不宜采用高毒性溶劑,�(duì)多元溶劑要盡可能的少��
  如果�(chǎn)品中含有大量溶劑,溶劑的純度也要考慮在其��
  (6)加樣的方�
  可以采用以下方法之一�(jìn)��-用注射器�(jìn)�-用旋�(zhuǎn)閥�(jìn)�-通過(guò)六通閥�(jìn)�-通過(guò)主泵�(jìn)�-通過(guò)輔泵�(jìn)�-固體上樣
  (7)泵的選用
  生產(chǎn)制備色譜泵的廠商很多。根�(jù)有無(wú)脈沖、能承受的壓�、控制的精度、售后服�(wù)等來(lái)選擇��
  (8)檢測(cè)器的選用
  一般的分析池的允許流速僅�5mL/min或�10mL/min。而專門的制備池的允許流速可�150mL/min。有�(shí),采用旁路分離管,將少量流體�(dǎo)入分析池�(jìn)行檢�(cè),是一�(gè)不錯(cuò)的辦�,但其濃度的誤差�(huì)相對(duì)較大�
  (9)組分保留�(shí)間的估計(jì)
  用分析柱子在同等色譜條件�(同樣的固定相和流�(dòng)�)�(cè)定保留時(shí)間后,按照單一組分的線流�(不是體積流�)一�,通過(guò)�(jì)算可以知道組分的大致保留�(shí)間區(qū)��
  分析譜圖的峰形狀,對(duì)確定保留�(shí)間也有很大的參考價(jià)��
  (10)�(chǎn)品的收集
  手工餾分收集�(fèi)�(shí)�(fèi)�,自�(dòng)餾分收集器有很大的方便。許多實(shí)�(yàn)室和工廠都采用了餾分收集��
  (11)超載、邊緣切�、中心切�、放大技�(shù)與非線性效�
  在制備色譜中,因?yàn)闆](méi)有必要達(dá)到分析色譜那樣的分離度,可以在一定范圍內(nèi)大大加大�(jìn)樣的濃度和體�。在做分離的�(shí)候,也有一些分析色譜的�(shí)�,不能用到的技�。因?yàn)槠P(guān)�,不在這里敘述�
  (12)柱轉(zhuǎn)換技�(shù)
  通過(guò)接頭或者閥門,實(shí)�(xiàn)柱子的簡(jiǎn)單延�(zhǎng),或者比較方便地�(shí)�(xiàn)�(duì)其中一�(gè)(或幾�(gè))組分的精��
  (13)比較新的制備色譜技�(shù)
  模擬移動(dòng)床可以連續(xù)�(jìn)�,并可以利用邊緣切割效用,而且采用了柱切換技�(shù),能更好的利用溶劑和填料,已�(jīng)�(yīng)用于工業(yè)化生�(chǎn)。其理論和技�(shù)也日益完��
  迎頭色譜、超臨界流體色譜、逆流色譜�(huán)形色�、氣相制備色譜等在科研和工業(yè)生產(chǎn)中也得到了應(yīng)��

維庫(kù)電子�,電子知�(shí),一查百��

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