薄層色譜(TLC)是色譜技�(shù)的一�:將固定相涂布于玻璃板上或鋁板上,成一均勻薄層,樣品中各組分隨流動(dòng)相在薄層中定向移�(dòng),不同組分和固定�/流動(dòng)相的作用力不同而實(shí)�(xiàn)了分��
薄層色譜,分離后的物�(zhì)通過(guò)直接觀�,或者染色處理后觀察,或者在紫外燈照射下觀�。其中紫外照射熒光觀察是常用的方法�
但是薄層色譜法具有操作簡(jiǎn)�、快速,�(shè)備投資小、檢�(cè)�(yùn)行成本低等特�(diǎn),在各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)��
1.�(cè)量方式:反射吸收、反射熒�;透射吸收、透射熒光
2.波長(zhǎng)范圍�190-800nm;掃描速度:Max100mm/s
3.光源:氘�、鹵鎢燈、高壓汞燈(�(biāo)�(zhǔn)配置,自�(dòng)�(zhuǎn)換)
4.波長(zhǎng)�(zhǔn)確度:優(yōu)�1nm;波�(zhǎng)重現(xiàn)性:�(yōu)�0.2nm
5.軟件:winCATS(Windows 2000/NT,32位操作系�(tǒng)�
1.波長(zhǎng)范圍寬、掃描速度��
2.自動(dòng)化程度高、操作簡(jiǎn)便;
3.單色器性能��
4.軟件功能�(qiáng)��
5.技�(shù)�
薄層色譜掃描儀是對(duì)薄層色譜�(jìn)行定量檢�(cè)分析的儀�,目前市�(chǎng)上有兩類薄層色譜掃描儀�
傳統(tǒng)薄層色譜掃描儀
是一種全波長(zhǎng)掃描儀,提供波�(zhǎng)200-800nm范圍的可選波�(zhǎng),通過(guò)檢測(cè)樣品�(duì)光的吸收�(qiáng)弱確定物�(zhì)含量。該掃描儀也能檢測(cè)254nm�365nm紫外照射�(chǎn)生的熒光�(qiáng)�,從而�(jìn)行特異性檢�(cè)�
傳統(tǒng)掃描儀的掃描方式分為:?jiǎn)喂馐鴴呙琛㈦p光束掃描和雙波長(zhǎng)掃描�
單光束掃描:采用單一光束(即單一波長(zhǎng)掃描),其結(jié)果就是上圖中一特定波長(zhǎng)條件下的單條曲線。儀器結(jié)�(gòu)�(jiǎn)�,但是基線不�(wěn),實(shí)際中很少使用�
雙光束掃描:采用同一波長(zhǎng)的兩�(gè)光束同步掃描,一�(gè)光束掃描樣品展開(kāi)通道,另一�(gè)光束掃描樣品通道旁邊的區(qū)�,這樣就可扣除吸收,部分消除薄層板展開(kāi)方向鋪板不均勻產(chǎn)生的誤差。但是無(wú)法消除垂至于展開(kāi)方向鋪板不均勻產(chǎn)生的誤差�
雙波�(zhǎng)掃描:兩�(gè)不同波長(zhǎng)的光束交替掃描樣品展�(kāi)的通道區(qū)�,波�(zhǎng)選擇�(shí),一�(gè)波長(zhǎng)為樣品大吸收位置,另一是吸收極小值位置。如上圖所�,如檢測(cè)目標(biāo)�3(則大吸收峰�290nm,極小值可�200nm�260nm�325nm�。這種方法可基本消除鋪板不均產(chǎn)生的誤差,因此掃描基線很�(wěn)定� ?
以上各種掃描方式�,根�(jù)光源大小(掃描精度)不同可分為直線掃描和鋸齒掃描�
直線掃描:用可以覆蓋樣品展開(kāi)通道的寬光束一次性掃完整�(gè)展開(kāi)通道,即在展�(kāi)方向上(圖中橫坐�(biāo)�,每�(gè)�(diǎn)的數(shù)�(jù)只是一�(gè)掃描�(shù)�(jù)�(diǎn)�
鋸齒掃描:采用點(diǎn)狀光源,光�(diǎn)尺寸小于通道寬度,因此在展開(kāi)方向移動(dòng)到任何一�(diǎn)�(shí),光源都要逐點(diǎn)沿樣品通道方向掃描,即形成“之”形(或鋸齒形掃描)。這樣,在展開(kāi)方向上每一�(diǎn)的數(shù)�(jù)都是多�(gè)�(diǎn)掃描�(jié)果的累加值。鋸齒掃描的精度相對(duì)直線掃描明顯提高�
目前,在定量分析中,薄層掃描多采用雙波長(zhǎng)鋸齒掃描�
薄層分析的誤差包括三�(gè)方面:點(diǎn)樣誤�、展�(kāi)誤差、定位誤差和檢測(cè)誤差�
采用自動(dòng)�(diǎn)樣器,誤差可控制�0.5%,熟練的分析人員用毛�(xì)管點(diǎn)樣,誤差小于1.0%,若用微量�(jìn)樣器,誤差會(huì)大一��
展開(kāi)誤差�(lái)自鋪板的均勻性和樣品展開(kāi)效果,若采用�(yù)制的高效薄層�,誤差會(huì)明顯降低,采用雙波長(zhǎng)鋸齒掃描,也能有效降低展�(kāi)誤差�
定位誤差值斑�(diǎn)的位置和大小判定,擴(kuò)�、脫尾等易產(chǎn)生定位誤�。檢�(cè)誤差�(lái)自光源的�(wěn)定�、光檢測(cè)器的�(wěn)定性以及樣品對(duì)光吸收(或熒光產(chǎn)生)的線性度等方靀為減少這些誤差,需要非常精密的�(jī)電系�(tǒng),這也直接�(dǎo)致產(chǎn)品高昂的�(jià)��
通常情況下,薄層掃描分析的誤差在3%以下�
薄層�(shù)碼成像分析儀
薄層�(shù)碼成像分析技�(shù)是利用數(shù)碼成像設(shè)備獲得薄層板上各�(diǎn)的光�(qiáng)度信�,之后對(duì)獲得圖像�(jìn)行分析的薄層分析技�(shù)。數(shù)碼成像設(shè)備包括兩種:照相�(jī)和掃描儀(由于數(shù)碼掃描儀采用逐行成像技�(shù),為便于區(qū)分傳�(tǒng)薄層掃描儀的逐點(diǎn)掃描,將�(shù)碼掃描儀稱為逐行掃描儀)�
和傳�(tǒng)薄層掃描一�,照相機(jī)或逐行掃描儀都具有光檢測(cè)系統(tǒng),它們都是將光量線性轉(zhuǎn)化為電信�(hào)的元�。不同的�,照相機(jī)和逐行掃描儀可�(jìn)一步將電信�(hào)�(zhuǎn)換成電腦圖像,圖像中單�(gè)�(diǎn)(像素)的顏色深淺反映了光的�(qiáng)��
因此,薄層數(shù)碼成像更接近人眼觀察檢�(cè),結(jié)果更直觀,因此非常適合鑒別,特別是中藥指紋圖譜的�(shí)��
�(shù)碼成像儀不僅能完成普通白光照射下的成像分�,再裝配254nm�365nm紫外燈后,也可以檢測(cè)特異熒光,特異熒光檢�(cè)�
根據(jù)�(shù)碼成像原�,薄層數(shù)碼成像從技�(shù)上可理解為單光源密集掃描。和傳統(tǒng)薄層掃描系統(tǒng)�?�,由于使用單一光源,效果不如雙波長(zhǎng)掃描(即�(wú)法消除鋪板不均產(chǎn)生的影響);而在掃描精度方面,卻要鋸齒掃��
在光源穩(wěn)定均勻性控制方�,照相機(jī)采用一次性閃�,不存在�(wěn)定性問(wèn)�,但是照相機(jī)用點(diǎn)光源�(fā)散形成面光源照射到薄層板�,均勻性較難保�;逐行掃描儀采用線性光源,光源�(wěn)定均勻性較傳統(tǒng)薄層掃描的光束要��
�(shù)碼成像分析以圖像顯示,對(duì)斑點(diǎn)正確選擇可消除定位誤�。因此在采用�(yù)制高效薄層板分析�(shí),數(shù)碼成像分析可獲得與傳�(tǒng)薄層掃描儀同等的定量精度和�(zhǔn)確度�
在操作時(shí)間方�,照相機(jī)成像快,逐行掃描儀需�(shù)秒或者幾十秒,而傳�(tǒng)薄層掃描儀通常要幾分鐘�
�(shù)碼成像分析的不足在于只能使用白光�254nm�365nm�312nm等特定光�,而數(shù)碼成像的顯著�(yōu)�(shì)是價(jià)�,比傳統(tǒng)薄層掃描儀低得多�
CAMAG TLC SCANNER 3 薄層色譜掃描儀是卡瑪公司四十余年研制薄層色譜儀器的智慧�(jié)�,它有波�(zhǎng)范圍寬、掃描速度�、自�(dòng)化程度高及操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),是目前世界上的薄層色譜掃描儀�
·掃描速度快(�100mm/s�,強(qiáng)大的�(shù)�(jù)采集(達(dá)9600DPS)及�(shù)�(jù)傳輸�115200baud/s�,配合高精度�(cè) 量平�(tái)(重�(xiàn)性X軸優(yōu)�100um,Y軸優(yōu)�50um�,保證掃描的�(zhǔn)確度與重�(xiàn)�。采�20mm/s掃描速度�(duì) 每條軌道�(zhǎng)80mm,有18條軌道的薄層板�(jìn)行掃�,只需不到5分鐘就可完成包括�(jì)算和生成�(bào)告在�(nèi)的所有工作�
·多一次能�(jì)�36條軌�,每條軌道多可檢�(cè)100種組��
·積分可采用自�(dòng)或手�(dòng)基線校正,自�(dòng)或手�(dòng)峰編��
·圖形外觀可方便地將物�(zhì)名稱與峰�(duì)�(yīng)�
·可對(duì)薄層板上所有檢�(cè)到的峰�(jìn)行自�(dòng)光譜掃描�
·靈活�(shè)置的�(bào)告可打印包含從帶有物�(zhì)名稱�2維模擬曲線到�(fù)雜的3維圖在內(nèi)的彩色圖��
·�(shù)�(jù)文件還包括固定相、色譜圖�(shù)�(jù)和圖像等所有信��
·定量�(jì)算支持以下校正功能:?jiǎn)嗡叫U?,使�?nèi)�(biāo)或外�(biāo)的線性校正,非線性回歸的多水平校�,相�(duì) �(biāo)�(zhǔn) 偏差(cv)統(tǒng)�(jì)等�
·副成分計(jì)算(包含在定量計(jì)算內(nèi))可用來(lái)按照歐洲或美�(guó)藥典�(guī)�,通過(guò)和主成分比較�(lái)定量未知峰�
·雙波�(zhǎng)掃描:色譜由兩�(gè)選定的不同波�(zhǎng)�(jìn)行掃�,積分時(shí)�(cè)量波�(zhǎng)掃描的信�(hào)減去參比波長(zhǎng)掃描的信�(hào),用 �(lái)扣除背景干擾。雙波長(zhǎng)掃描還可用于�(duì)未完全分離的峰�(jìn)行定��
·多波�(zhǎng)掃描:色譜多可用31種不同波�(zhǎng)掃描,允許多重計(jì)�,以�(dá)到優(yōu)化選�,定量計(jì)算時(shí)�(duì)每一片斷� 別選用佳波長(zhǎng)的數(shù)�(jù)。winCATS的這一功能是薄層色譜中��
·儀器校�(yàn):可�(duì)掃描儀的機(jī)�、光路及電子功能�(jìn)行自�(dòng)�(jiān)�,并能�(jìn)行自�(dòng)�(diào)�,糾正偏差。校�(yàn)功能還可 �(yīng)用于自動(dòng)�(diǎn)�、自�(dòng)展開(kāi)儀等所有可由winCATS控制的儀��
·軌道�(yōu)化:可對(duì)每一色譜軌道�(jìn)行多次掃�,每次掃描位置略微側(cè)移,自動(dòng)�(jì)算軌道的高峰并用于定�,可 �(duì)歪曲的色譜�(jìn)行正確計(jì)��
·光譜掃描:可�(duì)所有軌道、所有斑�(diǎn)�(jìn)行全光譜掃描,自�(dòng)確認(rèn)光譜位置,并組分鑒別及純度鑒定功能。光譜記錄范圍可自由地在190nm�800nm選擇� 燈從D2到W燈自�(dòng)�(zhuǎn)換, 光譜記錄速度�(dá)100nm/s,光譜采�40�/nm,確保光譜掃描快速準(zhǔn)確�
·光譜�(kù):卡瑪可提供常見(jiàn)藥物的光譜庫(kù),與用戶自己建立的薄層色譜光譜庫(kù)�(jié)�,對(duì)不同薄層板上的光譜記� �(jìn)行比較�
·符合美國(guó)FDA 21 CFR part 11有關(guān)電子記錄和電子簽名等的規(guī)�,具有工作日�,記錄所有操作信�、儀�
�(yùn)行狀況(包括�(diǎn)�、展�(kāi)、掃�、成像等步驟中所有可用winCATS控制的儀器)、數(shù)�(jù)變動(dòng)��
1 薄層板制備:除另有規(guī)定外,將1份固定相�3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平穩(wěn)地移�(dòng)涂布器�(jìn)行涂布(厚度�0.2�0.3mm),取下涂好薄層的玻璃板,置水平�(tái)上于室溫下晾�,后�110℃烘30分鐘。即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過(guò)透射光和反射光檢視)�
2 �(diǎn)樣:除另有規(guī)定外,用�(diǎn)樣器�(diǎn)樣于薄層板上,一般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm,點(diǎn)樣直徑為2—�4mm,點(diǎn)間距離約�1.5�2.0cm,點(diǎn)間距離可視斑�(diǎn)�(kuò)散情況以不影響檢出為�。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表��
3 展開(kāi):展�(kāi)室如需�(yù)先用展開(kāi)劑飽�,可在室中加入足夠量的展�(kāi)劑,并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展�(kāi)劑中,密封室�?shù)纳w,使系統(tǒng)平衡或按正文�(guī)定操�。將�(diǎn)好樣品的薄層板放入展�(kāi)室的展開(kāi)劑中,浸入展�(kāi)劑的深度為距薄層板底�0.5�1.0cm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中�,密封室蓋,等展�(kāi)至規(guī)定距離(一般為10�15cm�,取出薄層板,晾�,按各品種項(xiàng)下的�(guī)定檢�(cè)�
如需用薄層掃描儀�(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描檢�,或直接在薄層上�(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描定量,則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法,除另有�(guī)定外,可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)�(gòu)特點(diǎn)及使用說(shuō)明,�(jié)合具體情�,選擇吸收法或熒光法,用雙波�(zhǎng)或單波長(zhǎng)掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多,故�(yīng)在保證供試品的斑�(diǎn)在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況�,將供試品與�(duì)照品在同一塊薄層上展開(kāi)后掃描,�(jìn)行比較并�(jì)算定量,以減少誤�。各種供試品,只有得到分離度和重�(xiàn)性好的薄層色�,才能獲得滿意的�(jié)果�
1 所用玻璃板�(yīng)洗凈不掛水珠,光滑平��
2 鋪板要均勻,厚度適宜,并于室溫下晾干后在110℃活�30分鐘,置� 有干燥劑的干燥箱或干燥器中備��
3 �(diǎn)樣點(diǎn)一般為圓點(diǎn),不能太大�
維庫(kù)電子�,電子知�(shí),一查百��
已收錄詞�170104�(gè)