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生化儀
閱讀�121時間�2022-04-11 10:40:15

    生化分析儀又常被稱為生化儀,是采用光電比色原理來測量體液中某種特定化學成分的儀�。由于其測量速度快、準確性高、消耗試劑量�,現(xiàn)已在各級�(yī)�、防疫站、計劃生育服務站得到廣泛使用。配合使用可大大提高常規(guī)生化檢驗的效率及收益�

功能及特�

    自動生化分析儀是將生化分析中的取樣、加試劑、去干擾�、混�、保溫、比�、結(jié)果計�、書寫報告和清理等步驟的部分或全部由模仿手工操作的儀器來完成。它可進行定時�、連續(xù)�(jiān)測法等各種反應類型的分析測定。除了一般的生化項目測定�,有的還可進行激素、免疫球蛋白、血藥濃度等特殊化合物的測定以及酶免�、熒光免疫等分析方法的應�。它具有快�、簡�、靈敏、準�、標準化、微量等特點�

    分類  自動生化分析儀有多種分類方�,常用的是按其反應裝置的�(jié)�(gòu)進行分類。按此法可將自動生化分析儀分為流動式和分立式兩大類�

    所謂流動式自動生化分析儀是指測定項目相同的各待測樣品與試劑混合后的化學反應在同一管道流動的過程中完成。這是代自動生化分析儀。過去說得多少通道的生化分析儀指的就是這一�。存在較嚴重的交叉污�,結(jié)果不太準確,�(xiàn)已淘��

    分立式自動生化分析儀與流動式的主要差別是每個待測樣品與試劑混合間的化學反應都是分別在各自的反應皿中完成�,不易出�(xiàn)較差污染,結(jié)果可�。但不可隨意使用


�(gòu)�

    因為自動生化分析儀是模仿手工操作的過程,所以無論哪一類的自動生化分析儀,其�(jié)�(gòu)組成均與手工操作的一些器械設(shè)備相�,一般可有以下幾個部分組成:

    1、樣品器:放置待測樣�、標準品、質(zhì)控液、液和對照液��

    2、取樣裝置:包括稀釋器、取樣探針和輸送樣品和試劑的管道等�

    3、反應池或反應管道:一般起比色皿(管)的作��

    4、保溫器:為化學反應提供恒定的溫��

    5、檢測器:如比色�、分光光度計、熒光分光光度計、火焰光度計、電化學測定儀�。不同儀器配置不同�

    6、微處理器:是分析儀的電腦部�,又叫程序控制器??刂苾x器所有的動作和功�,使用者可通過鍵盤與儀器“對話”,同時電腦還能接受從各部件反饋來的信號,并作出相應的反應,對異常情況發(fā)出一定的指示信號。分析軟件和分析�(jié)果一般貯存在磁盤�,可共查��

    7、打印機:可繪制反應動態(tài)曲線和打印檢驗報告單��

    8、功能監(jiān)測器:顯示屏就是其中一部分,可查看反應狀�(tài)、人機“對話”的情況、當前儀器工作狀�(tài)、分析結(jié)果等�


流動�--空氣分段系統(tǒng)

    這種分析儀的特點是通過比例定量泵擠壓彈性樣品管、空氣管和試劑管(通稱“泵管”),將樣品依次連續(xù)地吸入并沿樣品管輸�,另一方面由空氣管吸入的氣泡將由同樣原理吸入并在試劑管道中連續(xù)流動的試劑分成均勻的節(jié)段,樣品流和試劑流在連續(xù)向前流動的過程中相遇、混�、透吸(必要時�、保�、反應及被測定。整個分析過程是液流在管道中連續(xù)流動的過程中完成��

流動�--非分段系�(tǒng)

    非分段系�(tǒng)是靠試劑或緩沖液來間隔每個樣品的反應�,這樣,在管道中連續(xù)流動的液體不被分�。非分段系統(tǒng)可再分為流動注入系統(tǒng)和間隙系�(tǒng)�

    1、流動注入系�(tǒng):該系統(tǒng)的組成與空氣分段系統(tǒng)相似,但某些�(jié)�(gòu)和工作原理有所不同,空氣分段系�(tǒng)是利用氣泡分段來防止管道中各反應液在流動過程中的交叉污染,而流動注入系�(tǒng)則是通過將樣品依次注入連續(xù)流動的試劑流管道中來達到防止交叉污染的目的的�

    2、間隙系�(tǒng):該系統(tǒng)的結(jié)�(gòu)、組成和工作原理與流動注入系�(tǒng)相似,但其特點是每一次進樣都必須在前一樣品的分析過程結(jié)束后(包括管道的清洗)才能開�,而不能連續(xù)地依次進樣,每次進樣間有一時間間隙,故有人稱為不連續(xù)流動式分析儀�


分立式自動生化分析儀

    分立式為代自動生化分析儀,它與流動式的主要差別是每個待測樣品與試劑混合間的化學反應都是分別在各自的反應皿中完成��

    稱為代自動生化分析儀的離心式自動生化分析儀,也應屬于分立式。因為在離心式分析儀�,每個待測樣品都是在離心力作用下,在各自的反應槽�(nèi)與試劑混�,并完成化學反應,繼而被測定的。離心式分析儀屬于“同步分析”,在離心力的作用下,各待測樣品幾乎同時與試劑混合、反應并被測定后打出報告;而其它分析儀是“順序分析”,即各待測樣品依次與試劑混�、反應先后被測定�

    袋式自動生化分析儀也應屬于分立�,它是用試劑袋代替反應管和比色皿,測定時每個待測樣品在各自的試劑袋�(nèi)進行反應并被檢測。還有一種稱為“干式自動生化分析儀”也屬于分立�。它的主要特點是采用固相化學技�(shù),即將試劑固相于膠片或濾紙小片等載體�。測定時使一定量的待測樣品分布于一張試紙片上,一定時間后用反射光度計測定�

    分立式自動生化分析儀,是目前各實驗室普遍使用的自動生化分析儀,一般都可以任意選擇測定項目,故稱為任選式自動生化分析儀。下面將重點介紹任選式自動生化分析儀�


任選�--加樣系統(tǒng)

    1、樣品轉(zhuǎn)盤:可放置小型樣品杯�(shù)十只。有的分析儀可直接用盛樣本的試管,有的還附有條形碼閱讀裝置,能識別樣本試管上的條形碼信息,不需給樣本編�,也不必輸入病人資料即可打印出該病人的化驗報��

    2、試劑室(倉):不同的分析儀試劑室可容納的試劑盒�(shù)量不�,一般可容納20多種試劑。有的試劑室?guī)в欣洳匮b�,帶有條形碼識別裝置的試劑室試劑可以任意放置試劑盒位��

    3、取樣裝置:有的分析儀取樣本和取試劑公用同一采樣針,由內(nèi)部的分流閥控制取樣本和取試劑;有的儀器有兩套取樣裝置,分別取樣本和取試劑。采樣針前端有液�?zhèn)鞲衅鞣乐箍瘴虿蓸俞樛獗谝后w掛淋,采樣臂中有預溫裝置。如果采用多試劑分析方法,將占用試劑室中試劑盒位�,會減少測定項目�


任選�--比色系統(tǒng)

    1、光源:大多�(shù)分析儀使用鹵素鎢絲�,工作波�325�800nm。有的分析儀使用氙燈,工作波�285�750nm�

    2、比色杯:有分立式比色杯、分立式�(zhuǎn)盤式比色�、離心式比色�、流動池。干式生化儀不需要比色杯,袋式生化儀由試劑袋�(jīng)擠壓自動形成比色�。比色杯光徑6-7mm,少�(shù)�10mm�

    比色杯中的反應液需要恒�,有37℃�30��25℃三檔可選擇,有的固定為37℃。多�(shù)用吹入恒溫空氣的方式,也有用恒溫水浴或半導體溫控裝置的�

    為了保證比色杯中反應液有±0.1℃的�,分析儀的環(huán)境溫度必需保持18�30�,室溫波動不�2��

    3、單色器:(1)干涉濾光片�2)光�

    4、檢測器:(1)光電倍增�,已很少�。(2)列陣固�(tài)光敏二極管�


任選�--供排水系�(tǒng)

    自動生化分析儀中有很多供水管道與電磁閥。只讀存儲器中軟件參數(shù)控制電磁閥與輸液泵供給各個部件的沖洗與吸�,后排出機外。隨機存儲器�(nèi)的分析參�(shù)控制電磁閥與注射器的步進電�,供應樣�、試劑和稀釋用水。有的生化儀還能自動沖洗比色杯供反復使用�

任選�--�(shù)�(jù)處理系統(tǒng)

    每個項目的檢測�(jié)果暫時儲存在隨機存儲器中,待某個樣本所需的項目全部檢測完�,由微機匯總打印出綜合報告單。微機的存儲器中可以存儲相當�(shù)量的病人�(shù)�(jù)與逐日的室�(nèi)�(zhì)控數(shù)�(jù),隨時可以按指令�(diào)出,在熒光屏上顯示或打印,也可存儲在軟盤中長期保�,隨時調(diào)閱�

任選�--分析順序

    每份樣品可以任選試劑室內(nèi)預置試劑盒的一項或全部項目的檢�。微機按輸入的指令,安排項目檢測次序,一般先做孵育時間長的終點法,后做監(jiān)測時間短的速率�,以便恒速打印綜合報告單。當指定樣本進入待測位置�,微機指令試劑盒進入試劑取樣位置,按所測項目的參數(shù)由加樣系�(tǒng)定量取樣,同時比色杯按微機的指令到達指定位置加樣。生化儀的分析速度與儀器加樣周期的時間有關(guān)。加樣周期的時間越短分析儀的速度越快。雙試劑法占用兩個加樣周�,分析速度減半�

任選�--主要分析參數(shù)

    1、試驗代�

    2、試驗名�

    3、試驗方�

    4、試驗類�

    5、溫�

    6、波長:可選擇主波長和次波長�

    7、反應類�

    8、終點法零點讀�(shù)

    9、樣本量與稀釋水�

    10、試劑量與稀釋水�

    11、樣�

    12、孵育時�

    13、延遲時�

    14、連續(xù)�(jiān)測時�

    15、標準液�(shù)�

    16、標準液濃度

    17、重復校標次�(shù)

    18、計算因子(F值)

    19、計量單�

    20、小�(shù)點位�(shù)

    21、底物耗盡

    22、線性度

    23、試劑吸光度上限與下�

    24、線性范�

    25、參考范�

    26、等等等�


任選�--分析參數(shù)的使�

    (一)儀器廠家提供的測定項目

    1、儀器公司自己生�(chǎn)常用項目試劑�、定標液(定值血清型標準液)與定值質(zhì)控血清,提供30種左右常用項目的分析參數(shù),供用戶直接使用。另外還有數(shù)十個項目參�(shù)�,由用戶自己開發(fā)新項��

    2、有的儀器公司自己不提供試劑�,但有合作的試劑公司,由合作試劑公司提供分析參數(shù)。因�,在購買儀器時必須購買一定數(shù)量指定試劑公司的試劑盒(包括定標液與定值質(zhì)控血清)�

    3、小型儀器公司既不生�(chǎn)試劑盒,也沒有合作試劑公�,分析參�(shù)表是空的,需要用戶自己設(shè)計分析參�(shù),因此難度很�。不過國�(nèi)代理商一般提供他們的�(shè)計參�(shù),往往個別參數(shù)不恰�,用戶自己應逐條核實�

    (二)好使用廠家的原裝參�(shù)

    1、原裝分析參�(shù)不應修改,僅計量單位要選用我國法定單位。用原公司指定的試劑�、定標液與定值質(zhì)控血清作室內(nèi)�(zhì)量控�,除非分析儀沒有�(diào)試好或有故障,一般能一次通過�

    2、不同公司的定標液在定值時所用原始標準的來源不同,其定值可以稍有差異。方法學相同的試劑盒配方也有差異,所以其它公司的定標液或用水劑標準液作儀器定�,使用非指定試劑盒作�(zhì)�,測得的�(shù)值與�(zhì)控血清的的預計值會有差�,這種情況不表示原裝分析參�(shù)不合��

    3、國�(chǎn)試劑盒的�(chǎn)量已大有提高,可選擇方法學相同的國產(chǎn)試劑盒與原公司指定試劑盒作并行檢測,實驗樣品應包括低值和高�,結(jié)果作相關(guān)分析。符合要求的可以使用。少�(shù)項目的方法學沒有符合要求的國�(chǎn)試劑盒,只有另行安排該項目的國產(chǎn)試劑分析參數(shù)。但原參�(shù)要保留或備份,等待合格的國產(chǎn)試劑盒出�(xiàn)�

    4、不論用原公司或國產(chǎn)試劑�,原分析參數(shù)不應隨意修改,尤其是主要參數(shù);如血清試劑比(包括稀釋水量)、孵育時間、延遲時間、檢測時�,因為這些參數(shù)一旦改變,線性范圍和各種限額參數(shù)都將�(fā)生改�,嚴重影響測定結(jié)果的準確性�

    5、雙試劑兩步法的方法學有很多�(yōu)�,如果分析儀為雙試劑式,好用雙試劑兩步法�

    6、底物耗盡參數(shù)不能刪去,否則高濃度�(jié)果出�(xiàn)低值;線性范圍如果刪�,高濃度�(jié)果也會偏�;試劑吸光度上下限如被刪�,分析儀將接受變�(zhì)試劑�

    (三)自己設(shè)計分析參�(shù)的原�

    如果儀器公司不提供分析參數(shù)或測定項目的方法學不�,可以自己設(shè)置分析參�(shù)。主要設(shè)計以下幾個參�(shù)�

    1、樣本試劑比�� 6、計算因��

    2、孵育時間� 7、底物耗盡限額�

    3、延遲時�� 8、線性度�

    4、監(jiān)測時�� 9、線性范圍�

    5、試劑吸光度上下��

    以上這些參數(shù)試劑盒說明書一般都會提供,可按此填入分析參�(shù)�,定標后即可進行日常工作,有些參�(shù)在以后的工作中逐步修正�


生化儀的參�(shù)�(shè)置問�

    一、生化儀雙波長測定中輔助波長的選擇:

    雙波長的應用是為了消除樣品中對測定有干擾的物�(zhì)的影�,而實際應用中選擇輔助波長主要用于消除脂血、溶血、黃疸的干擾。脂血樣品中的脂質(zhì)吸收光譜�300�600nm均有吸收,呈逐漸下降的趨�;溶血樣品中的血紅蛋白在350nm�400nm�540nm�580nm�4個吸收峰;黃疸樣品中的膽紅素在300�500nm均有吸收,�400�500nm之間有強吸收�。由于脂血、溶血、黃疸樣品在較寬的波長范圍內(nèi)有較強的吸收光譜存在,因而常常同測定波長有重�,此時測得的吸光度包含待測物質(zhì)的吸光度和干擾物�(zhì)的吸光度,選用輔助波長可消除干擾物�(zhì)的吸光度。在輔助波長選擇�,根據(jù)測定波長選擇輔助波長,要求干擾物質(zhì)在測定波長同輔助波長有相同的吸光�。例�:鉬酸銨法測定無機�,其測定波長為340nm,對于溶血樣品,血紅蛋白在340nm有較強吸�,其吸光度�380nm處吸光度相同,選用380nm作輔助波�,�340nm�380nm兩波長的吸光度之差測定無機磷,可消除溶血對測定的干擾�

    二、生化儀測定時間的選擇:

    對于終點分析,測定時間的選擇應充分考慮到干擾的問題。例�:溴甲酚綠法測定白蛋白選用一點終點分析法,白蛋白同溴甲酚綠反應�,在一分鐘�(nèi)基本上反應完�,隨著反應時間的延�,α 球蛋白同溴甲酚綠反應形成干擾,因而溴甲酚綠法測定白蛋�,其測定時間應定于1分鐘。對于速率分析�,一般用于酶活力的測�,而酶活力的大小是用反應速度來表� ,因而要求在零級反應期內(nèi)測定反應速率,此時的反應速率不受底物濃度的影�,僅同酶活力大小有�(guān)。因�,測定時間應選在零級反應期�(nèi)。對于一種物�(zhì)的測�,由于選擇試劑和分析方法不�,其測定時間也隨之變化,因而對于特定的試劑和分析方�,應先做出反應進程曲線,從曲線上選擇佳的測定時間�

    三、生化儀樣品量和試劑量的選擇�

    對于不同的全自動生化分析儀,其測定所需的反應液總量不同。而試劑廠商給出了樣品量和試劑量的佳比�,根據(jù)比例同時縮小或增加用�,同時滿足小的反應液總��


生化儀的應�

    隨著全自動生化分析儀的應用的普及,對全自動生化儀器的應用越來越顯得重�,一般情況下,廠家在裝機后只進行簡單的應用培�,或�,有時有些功能即使廠家在培訓時已經(jīng)講解�,�,我們的工作人員很難在極短的時間�(nèi)把廠家工程師所講解的大量的學習�(nèi)��

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