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分光光度�
閱讀�6355時間�2011-02-26 18:40:59

  分光光度�是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收�,對該物質進行定性和定量分析的測量儀。它主要�光源、單色器、樣品室、檢測器、信�處理�和顯示與存儲系統(tǒng)組成。目前,它已經成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀�,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量�

特點

  1、采用高性能�(yōu)質光�,波長精度更��

  2、采用進口鎢燈,發(fā)光效率高,使用壽命長,功耗降��

  3、超大規(guī)模集成,T/A轉換精度�,穩(wěn)定性高�

  4、微機系�(tǒng)的應�,使操作使用簡單可靠�

原理

  分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光�,從而轉化成樣品的濃�。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比�

配件

  比色杯是分光光度計的重要配件,比色杯按照材質大致分為石英�、玻璃杯以及塑料�。根據不同的測量體積,有比色杯和毛細比色杯等。一般測試核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不適合比色法測定。因為反應中的染料(如考馬斯亮蘭)能讓石英和玻璃著�,所以必須采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不適合用于在紫外范圍內測試樣品�

使用方法

  �722型分光光度計為例,來介紹分光光度計的使用方法�

 ?�?)將靈敏度旋鈕調�"1"檔(放大倍率最?�?�

  �2)開啟電�,指示燈�,儀器預�20分鐘,選擇開關置�"T"

 ?�?)打開試樣室蓋(光門自動關閉�,調節(jié)"0%T"旋鈕,使數字顯示�"00.0"�

  �4)將裝有溶液的比色皿放置比色架中�

  �5)旋動儀器波長手�,把測試所需的波長調節(jié)至刻度線處�

  (6) 蓋上樣品室蓋,將參比溶液比色皿置于光�,調節(jié)透過�"100%T"旋鈕,使數字顯示�"100.0T"(如果顯示不�100%T,則可適當增加靈敏度的檔�,同時應重復"3",調整儀器的"00.0"�

  (7)將被測溶液置于光路�,數字表上直接讀出被測溶液的透過率(T)��

 ?�?)吸光度A的測量,參照"3""6"調整儀器的"00.0"�"100.0",將選擇開關置于A旋動吸光度調零旋鈕,使得數字顯示�.000,然后移入被測溶�,顯示值即為試樣的吸光度A��

  �9)濃度C的測�,選擇開關由A旋至C,將已標定濃度的溶液移入光路,調節(jié)濃度按鈕,使得數字顯示為標定值,將被測溶液移入光�,即可讀出相應的濃度��

 ?�?0)儀器在使用�,應常參照本操作方法�"3""6"進行�"00.0"�"100.0"的工��

 ?�?1)每臺儀器所配套的比色皿不能與其它儀器上的比色皿單個調��

 ?�?2)本儀器數字顯示后背部,帶有外接插�,可輸出模擬信號,插�1腳為��2腳為負接地線�

  �13)如果大幅度改變測試波長�,需等數分鐘后才能正常工�。(因波長由長波向短波或短波向長波移動時,光能量變化急劇,光電管受光后響應較�,需一段光響應平衡時間�

技術參�

  波長范圍�320�1000nm

  光譜帶寬�4nm

  雜散光:�0.5%(在360nm處)

  波長準確度:�(yōu)于�2nm

  透射比準確度:≤±1nmT

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